Главная » 2013 » Ноябрь » 19 » Скачать Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства. Клюшник, бесплатно
00:59
Скачать Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства. Клюшник, бесплатно
Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства
Диссертация
Автор: Клюшник, Татьяна Павловна
Название: Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства
Справка: Клюшник, Татьяна Павловна. Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.04 Москва, 1984 131 c. : 61 85-3/169
Объем: 131 стр.
Информация: Москва, 1984
Содержание:
I ВВЕДЕНИЕ
П ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Современные подходы к идентификации нейроспецифических антигенов
1 Идентификация нейроспецифических белков по их специфичности для нервной ткани
2 Направленный поиск белков, обеспечивающих уникальную структуру и организацию нервной ткани
3 Поиск нейроспецифических изоформ известных ферментов
4 Поиск нейроспецифических белков с использованием генно-инженерных методов
Ш Материалы и методы
1У РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЕ
§ I Выделение нейроспецифического антигена
§ 2 Получение моноспецифических антисывороток к нейроспецифическому антигену 10-40-4; метод иммуноферментного определения антигена
§ 3 Специфичность антигена 10-40-4 для ткани мозга
§ 4 Видовая специфичность антигена 10-40-4
§ 5 Сравнительная характеристика физико-химических свойств антигена 10-40-4 из мозга человека и крысы
§ 6 Клеточная и региональная локализация антигена 10-40-4 в мозге человека
У ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
У1 УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ на русском языке на английском языке
Введение:
Актуальность исследования. В настоящее время изучение нейроспецифических белков представляет значительный интерес, так как позволяет приблизиться к пониманию фундаментальных механизмов функционирования мозга. Становится все более очевидным, что нейроспецифические белки принимают участие в таких специфических процессах, протекающих в нервной ткани, как генерация и проведение нервного импульса, установление контактов между клетками, регуляция проницаемости ионных каналов, а также обучение и память. Однако, четко определить роль нейроспецифических белков в этих процессах пока невозможно.
В настоящее время идентифицировано около 60 нейроспецифических белков, однако, информация о многих из них исчерпывается лишь сообщением об их выявлении. Далеко не для всех нейроспецифических белков достаточно подробно изучены их физико-химические свойства, клеточная и субклеточная локализация, а также их специфичность для тех или иных областей мозга, что также может иметь значение для понимания их роли в функционировании нервной системы.
Существуют также многочисленные данные о роли нейроспецифических белков при различных патологических состояниях. Так, появление некоторых из них с спинномозговой жидкости при ряде нервных и психических заболеваний рассматривается как индекс повреждения нервной ткани. Рядом авторов в сыворотке крови больных психическими заболеваниями обнаружены антитела и сенсибилизированные лимфоциты к мозговым, в том числе и нейро-специфическим белкам.
Ранее в нашей лаборатории из экстракта водорастворимых белков мозга человека была выделена фракция, условно обозначенная фракция 10, обогащенная нейроспецифическими белками. К белкам этой фракции в сыворотке крови больных шизофренией с большой частотой (до 70 %) выявлялись антитела.
Сказанное выше определяет актуальность работы, посвященной выделению из фракции 10 нейроспецифического антигена, получившего название 10-40-4 по номерам хроматографических фракций, а также изучению его физико-химических характеристик, клеточной и региональной локализации в нервной ткани.
Цели и задачи исследования. Целью данного исследования является выделение и изучение свойств нейроспецифического антигена из фракции, к которой с большой частотой выявляются антитела в сыворотке крови больных шизофренией. Получение индивидуального препарата нейроспецифического белка, моноспецифической сыворотки к нему, а также разработка высокочувствительного иммуноферментного метода его определения позволят в дальнейшем подойти к изучению его функциональной роли, а также оценить его участие в индукции патологических иммунных реакций при психических заболеваниях.
В задачи исследования входит:
1. Разработка схемы выделения нейроспецифического антигена 10-40-4, выявленного иммунохимическими методами.
2. Получение моноспецифической антисыворотки к нейро-специфическому белку 10-40-4.
3. Изучение физико-химических свойств выделенного белка, а также изучение эволюционной стабильности его антигенной детерминанты.
4. Разработка метода количественного определения нейроспецифического антигена 10-40-4.
5. Изучение клеточной и региональной локализации вццелен-ного антигена.
Научная новизна. Выделен новый нейроспецифический антиген из ткани мозга человека и крысы. К этим антигенам получены моноспецифические антисыворотки. По своим физико-химическим свойствам, а также по специфичности антигенных детерминант для отдельных видов млекопитающих, выделенный антиген отличается от других описанных в литературе нейроспецифических белков.
Разработан высокочувствительный метод иммуноферментного определения вццеленного антигена в белковых экстрактах, с использованием которого проведено измерение его количества в различных органах человека, а также в отдельных структурных образованиях мозга.
Практическая ценность. Выделен и охарактеризован новый нейроспецифический антиген из фракции 10, к которой в сыворотке крови больных шизофренией с высокой частотой (до 70 %) выявляются антитела. Получена также моноспецифическая антисыворотка к нему и разработан иммуноферментный метод определения вццеленного антигена с чувствительностью 1-2 нг/мл, который в данной работе был использован для подтверждения нейроспецифи-чности выделенного антигена и для изучения его региональной локализации в мозге. В дальнейшем метод предполагается использовать для измерения содержания антигена в биологических жидкостях больных нервно-психическими заболеваниями.
Описанный нейроспецифический белок и полученные к нему моноспецифические антисыворотки используются при осуществлении совместных исследований, проводимых БНЦПЗ АМН СССР и Белградским центром иммунологических исследований (CiPD), а также используется в исследованиях, входящих в Государственную программу, направленных на изучение роли нейроспецифи-ческих белков в процессах, протекающих в мозге в нормальных и патологических условиях.
Автор выражает глубокую благодарность коллективу лаборатории нейрохимии и химии физиологически активных веществ за содействие в осуществлении этой работы.
П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ИДЕНТИШАЩИ НЕЙРОСПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИГЕНОВ.
Настоящий литературный обзор посвящен анализу возможных подходов к идентификации нейроспецифических антигенов, среди которых можно выделить следующие направления: